MALDI-TOF技術(shù)快速鑒定鐮刀菌及伏馬菌素
發(fā)布時(shí)間:2021-05-11 閱讀次數(shù)：829次
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鐮刀菌是污染農(nóng)作物的主要霉菌，其產(chǎn)生的真菌毒素之一伏馬菌素是食物和飼料中重要污染因素。伏馬菌素是一種致癌物，已成為繼黃曲霉素之后的又一研究熱點(diǎn)。本文研究了來自巴西伯南布哥州3個(gè)不同地區(qū)玉米粒中分離的鐮刀菌中潛在的產(chǎn)毒菌株。使用包括經(jīng)典分類，分子生物學(xué)，MALDI-TOF MS和MALDI-TOF MS / MS的多種方法，成功分離鑒定鐮刀菌60個(gè)菌株。所有60個(gè)菌株用MALDI-TOF MS/MS方法精準(zhǔn)鑒定伏馬菌素B1（721.83 g/mol）和B2（705.83 g/mol）。
MALDI-TOF已證明在鑒定絲狀真菌上有很高的潛力，某些情況可以鑒定到菌株水平。目前微生物鑒定主要基于核糖體蛋白指紋圖譜技術(shù)。同時(shí)微生物中的多糖、脂質(zhì)等也可以通過MALDI-TOF技術(shù)鑒定。能夠在農(nóng)產(chǎn)品中產(chǎn)生霉菌毒素的菌種，威脅著人類和動(dòng)物的健康，MALDI-TOF快速準(zhǔn)備鑒定種間和種內(nèi)變異菌種，及其產(chǎn)生毒素的能力，守護(hù)人類和動(dòng)物的健康。
在實(shí)驗(yàn)室日常分析中，經(jīng)典表型分析很重要，但是這些方法經(jīng)常也會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤識別。尤其對于鐮刀菌屬，因?yàn)樗麄兊奈⒂^形態(tài)會(huì)根據(jù)所使用的培養(yǎng)基而變化。由于鐮刀菌屬內(nèi)的形態(tài)變化，以及柱孢屬和支頂孢屬的一些菌種也可以產(chǎn)生梭形和多細(xì)胞分生孢子，類似于鐮刀菌產(chǎn)生的分生孢子，需要分子生物學(xué)做進(jìn)一步鑒定。
通過與分子生物學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，MALDI-TOF在種水平鑒定鐮刀菌的敏感性為100%正確。未觀察到菌株的地理起源差異，這也與分子生物學(xué)數(shù)據(jù)一致。相比分子生物學(xué)技術(shù)，MALDI-TOF是一種高通量，快速，低成本的鑒定方法。同時(shí)，采用二級MSMS技術(shù)，評估伏馬菌素B1和B2的產(chǎn)生菌株。60個(gè)菌株全部評估為潛在的伏馬菌素B1和B2的產(chǎn)生者，這與分子生物學(xué)基于FUM1基因擴(kuò)增獲得的數(shù)據(jù)相符。MALDI-TOF MS/MS評估伏馬菌素的方法更加方便，快速，準(zhǔn)確，迅速鎖定潛在毒素產(chǎn)生菌種。
島津微生物快速鑒定專用iDplus Cofidence和iDplus Performance，是兩款具有線性和反射模式的MALDI-TOF組合系統(tǒng)。高性能的MS和MS/MS功能，為微生物蛋白、多肽研究提供更多選擇。MS/MS可用于多肽和蛋白的結(jié)構(gòu)和序列解析，菌種毒素鑒別等。微生物中的脂質(zhì)、多糖，也可以用MALDI-TOF技術(shù)進(jìn)行研究。MALDI-TOF微生物鑒定技術(shù)在食品安全中，正發(fā)揮著越來越重要的作用。
島津MALDI-TOF微生物鑒定工作流程：
微生物鑒定綜合樣本下載
參考文獻(xiàn)：
Toxins 2016, 8, 54; doi:10.3390/toxins8030054
