探究溫度對液相色譜分析的影響
發(fā)布時間:2024-07-29 閱讀次數(shù)：579次
本期就溫度對高效液相色譜分析的影響展開說明，重點介紹柱溫和環(huán)境溫度對分析的影響。
一、柱溫對高效液相色譜分析的影響，通過范特霍夫方程來表達。
原則上，范特霍夫方程是用于計算在不同溫度下某反應(yīng)平衡常數(shù)的方程：
㏑K=－△H/RT+△S/R
K：保留因子，描述色譜柱溫度相關(guān)系數(shù)
△H：流動相和固定相之間分析物的焓變
△S：相應(yīng)的熵變
R：相位關(guān)系的常數(shù) T：溫度
從公式中可以看出：lnk與時間1/T之間是線性關(guān)系，實際上因物質(zhì)特性、條件差異不一定出現(xiàn)良好相似性，在高效液相色譜檢測中柱溫的變化常常會造成某些指標不良。
案例一：柱溫對含量、分離度及理論塔板數(shù)的影響。
某公司測試果糖及葡萄糖含量，分離度及理論塔板數(shù)結(jié)果異常。
1含量結(jié)果誤差大
< 數(shù)據(jù)對比結(jié)果 >
2分離度及理論塔板數(shù)下降
< A數(shù)據(jù) >
3原因分析
糖樣要求溫度：85℃，糖類分析通常高溫會帶來高分離度，但超過90℃之后幾乎沒有變化，柱溫低于70℃對于許多糖類來說，不能提供足夠分離度。
經(jīng)排查發(fā)現(xiàn)，柱溫箱溫度偏差較大，與實際溫度相差20度，修正柱溫后，測試正常。
二、環(huán)境溫度對高效液相色譜分析的影響，歸類來說主要包含兩個方面：其一對檢測器影響；其二對流動相影響。
案例二：室溫對基線噪音的影響；某公司測試過程中基線噪音異常變大。
設(shè)置波長接近流動相截止波長時，室溫波動超過1℃引發(fā)噪音變大。室溫穩(wěn)定后，基線正常。
案例三：某公司測試過程中保留時間異常。
室溫波動超過3℃以上會引發(fā)壓力波動，室溫穩(wěn)定后重新測試，保留時間正常。
檢查室溫變化發(fā)現(xiàn)，室溫波動范圍2-4度左右，柱壓隨室溫變化而變化。
以上可知，環(huán)境溫度對高效液相色譜分析的影響，主要在以下兩個方面。
① 設(shè)置波長接近流動相截止波長且室溫波動大于1℃的情況下，造成噪音過大的情況，不影響保留時間。
② 流動相不在截止波長范圍且室溫波動大于3℃以上的情況下，造成流動相溫度的變化，進而影響保留時間、基線漂移，但不影響基線噪音。
通過檢測器的原理，我們可以發(fā)現(xiàn)PDA、RF、RID等檢測器也易受環(huán)境溫度的影響。
四季更迭，氣溫波動。液相色譜儀使用中應(yīng)關(guān)注溫度變化，從而消除溫度對分析的影響。