島津臺式機(jī)MALDI-8020在Wickerhamiella trop
發(fā)布時間:2024-12-06 閱讀次數(shù)：408次
在微生物研究的眾多領(lǐng)域中，菌種的準(zhǔn)確分離鑒定始終是關(guān)鍵環(huán)節(jié)。Wickerhamiella（擬威客酵母菌）作為主要來源于環(huán)境樣本的芽殖酵母屬，已被發(fā)現(xiàn)多達(dá)40種。然而，從人類臨床樣本中分離出的該屬酵母通常僅有三種：W. infanticola、W. pararugosa和W. sorbophila。
? 白念珠菌（W. pararugosa）從中國的人糞便、意大利的口腔和日本的唾液中被分離出來，之前的研究報告稱，白念珠菌會引起血液感染；
? W. sorbophila從人類糞便中分離出來；
? W.infanticola從德國嬰兒耳朵里分離出來。
Wickerhamiella tropicalis（熱帶擬威客酵母菌）于2020年首次從環(huán)境樣本中被分離出來（Sakpuntoon等人，2020），此前從未在人類樣本中有所發(fā)現(xiàn)。在本病例報告中，令人矚目的是，研究者首次在引發(fā)嚴(yán)重感染的血液培養(yǎng)中成功分離出W. tropicalis。酵母樣真菌和酵母菌往往會導(dǎo)致免疫功能低下（如接受免疫抑制劑、化療或器官移植）患者的血流感染。鑒于這些菌種對抗真菌藥物的敏感性各異，快速正確鑒定菌種類型，并及時啟動恰當(dāng)?shù)闹委煼桨?，對于改善患者的預(yù)后意義重大。
MALDI-TOF
W. tropicalis臨床分離和鑒定案例
2022年，研究者從一位有B細(xì)胞前體淋巴母細(xì)胞白血病病史的6歲日本女性血液樣本中分離出了熱帶擬威客酵母菌（W. tropicalis）。最初通過常規(guī)微生物檢查形態(tài)學(xué)鑒定為念珠菌屬，隨后通過核糖體DNA（rDNA）的內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）測序，最終鑒定為熱帶擬威客酵母菌（W. tropicalis）。該分離物的ERG11和FKS1中的氨基酸替換分別與念珠菌對唑和棘白菌素的耐藥性有關(guān)，且對氟康唑和米卡芬凈表現(xiàn)出中度耐藥性。幸運的是，病人通過米卡芬凈治療獲得成功。
此外，MALDI-MS檢測到三個熱帶擬威客酵母菌（W.tropicalis）特有的新峰，這表明MALDI-MS分析在常規(guī)微生物檢查中能夠?qū)崿F(xiàn)對擬威客酵母菌的快速檢測。臨床實驗室常規(guī)鑒定酵母樣真菌的方法，如革蘭氏染色和真菌分離培養(yǎng)，難以準(zhǔn)確的鑒定到真菌菌種類型?；驕y序雖為鑒定菌株的常用良法，但出結(jié)果時間相對MALDI-TOF快速微生物鑒定方法更長。MALDI-TOF能夠?qū)崿F(xiàn)快速、高通量且準(zhǔn)確地鑒定微生物菌種。在本研究中，采用島津MALDI-8020成功識別Wickerhamiella菌種特有峰，并發(fā)現(xiàn)了三個與之相關(guān)的新峰。
對每種真菌提取物采集了五張單獨的質(zhì)譜圖，質(zhì)量范圍從m/z 2000到20000。生物標(biāo)志物搜索和峰值匹配使用島津eMSTAT Solution軟件進(jìn)行。
不同菌種代表性指紋圖譜，峰值分別與峰值列表中的峰值對應(yīng)
指紋圖譜質(zhì)量區(qū)間m/z 6000至6600部分的放大圖顯示，與W. tropicalis相比，W. sorbophila 和W. spandovensis峰2、3和4的m/z值變化很小
峰值列表
MALDI-TOF
小結(jié)
該研究使用島津MALDI-8020建立了快速鑒定Wickerhamiella菌種的方法。使用MALDI-MS建立數(shù)據(jù)庫對于臨床實驗室鑒定引起嚴(yán)重感染的酵母樣真菌至關(guān)重要。
島津臺式機(jī)MALDI EasyCare系列，EasyCare功能可輕松進(jìn)行自我維護(hù)，增加實驗室正常運行時間，提高分析效率。其體積小巧，能安裝于任何實驗室。尤其適合有大量樣本分析需求的實驗室，如微生物鑒定、成像分析、生物制藥QC等領(lǐng)域。
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參考資料：
文獻(xiàn)題目《Isolation and identification of m tropicalis from blood culture by MALDI-MS》
期刊Frontiers in Cellular and Infection Microbiology
作者Satomi Takei1,2, Kanae Teramoto2,3，et al.
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