臺式MALDI EasyCare系列快速鑒定寡核苷酸藥物及雜質(zhì)
發(fā)布時間:2025-04-29 閱讀次數(shù)：151次
治療性寡核苷酸，包括小干擾RNA（siRNA）、反義寡核苷酸等核酸藥物形式，被視為針對一系列傳統(tǒng)方法難以靶向治療的疾病的新型治療手段。新型寡核苷酸藥物的合成面臨重大的分析挑戰(zhàn)，因?yàn)樾枰獙ζ渫暾蛄羞M(jìn)行確認(rèn)，并對雜質(zhì)譜圖鑒定。為助力進(jìn)一步加速寡核苷酸表征，島津LabSolutions Insight Biologics 軟件專為支持LC-MS、QTOF LC-MS/MS以及MALDI-TOF的先進(jìn)數(shù)據(jù)處理流程而開發(fā)，可兼容多種質(zhì)譜類型的數(shù)據(jù)。
Insight Biologics能夠自動識別數(shù)據(jù)來源的質(zhì)譜儀器類型（LC-MS、QTOF LC-MS/MS或MALDI-TOF），并通過"一鍵式分析"自動匹配針對各臺MS儀器定制的處理參數(shù)預(yù)設(shè)。
應(yīng)用案例（一）寡核苷酸表征及序列鑒定
待測樣品：
使用硫代磷酸酯修飾的寡核苷酸純化樣品（20-mer反義寡核苷酸；C229
H316 N69 O121 P19 S19；單同位素質(zhì)量7164.04032，Te-smCe-sTe-sGe-sGd-sTd-sAd-sCd-sAd-sTd-sGd-sAd-sAd-sAe-sTe-smCe-smCe-smCe）。
檢測條件：
儀器采用MALDI-8030。MS掃描范圍m/z 1000-30000；基質(zhì)使用THAP與檸檬酸氫銨。MS/MS使用 ISD，采集范圍 m/z 600-10000；基質(zhì)使用3-羥基吡啶甲酸（HPA）和檸檬酸氫銨。
數(shù)據(jù)處理軟件：
LabSolutions Insight Biologics寡核苷酸表征軟件（2.0版）。
檢測及分析結(jié)果：
MALDI數(shù)據(jù)分析同樣支持使用相同的序列編輯器和標(biāo)稱質(zhì)量處理設(shè)置。該設(shè)置基于針對此技術(shù)預(yù)期的豐富碎片離子系列（ISD譜圖中顯示w、z、a、d型離子）。分支模式序列覆蓋顯示表明，PS20mer樣品中的FLP實(shí)現(xiàn)了90%的序列覆蓋率（MS/MS得分為0.90）。
應(yīng)用案例（二）快速監(jiān)測寡核苷酸雜質(zhì)
寡核苷酸藥物（OTs）是一種新興的治療模式，具有較高的市場增長潛力。OTs主要通過基于亞磷酰胺化學(xué)的固相合成法生產(chǎn)，該合成過程可能引入多種與序列相關(guān)的雜質(zhì)。因此，有必要確認(rèn)這些雜質(zhì)在制造廠的純化過程中已被去除。
液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC/MS）通常用于分析產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)，但考慮到數(shù)據(jù)采集和解讀所需的時間框架，這種方法存在一定局限性。另一種方法是采用MALDI-MS作為快速簡便的分析工具，用于監(jiān)測寡核苷酸藥物的純化過程。
待測樣品：
一種模擬寡核苷酸藥物（OT）序列的合成反義藥物"Model MOE-ASO 18聚體"。該寡核苷酸的粗產(chǎn)物通過離子交換色譜法進(jìn)行純化。
檢測條件：
儀器采用MALDI-8030，基質(zhì)THAP 。
數(shù)據(jù)處理軟件：
寡核苷酸藥物分析由LabSolutions Insight Biologics version 2.0軟件完成 ，統(tǒng)計(jì)分析由島津eMSTAT Solution軟件完成。
檢測及分析結(jié)果：
批量純化樣品的MALDI質(zhì)譜圖及其使用島津統(tǒng)計(jì)分析軟件eMSTAT Solution進(jìn)行主成分分析（PCA）的結(jié)果。
本研究開發(fā)了一種基于MALDI-TOF MS的快速、可重復(fù)的寡核苷酸藥物雜質(zhì)分析方法，并應(yīng)用該方法驗(yàn)證了寡核苷酸純化工藝的有效性?；谠摍z測方法的快速性和重現(xiàn)性特征，其可便捷應(yīng)用于生產(chǎn)過程控制。
島津MALDI-8000系列產(chǎn)品包括MALDI-8020 EasyCare、MALDI-8030 EasyCare、MALDI-8020和MALDI-8030四款機(jī)型。剛榮獲了My Green Lab頒發(fā)的ACT環(huán)保標(biāo)簽認(rèn)證，踐行島津?qū)沙掷m(xù)發(fā)展和環(huán)保責(zé)任的承諾。EasyCare功能可輕松進(jìn)行自我維護(hù)，將增加實(shí)驗(yàn)室正常運(yùn)行時間，提高分析效率，適合有大量樣本分析需求的實(shí)驗(yàn)室，如生物制藥QC、微生物鑒定、成像分析等領(lǐng)域。
參考資料：
島津應(yīng)用新聞：
1. Integrated Data Analysis of Oligonucleotide Therapeutics Using LC-MS, LC-MS/MS and MALDI techniques
2. Rapid monitoring of the purification process of oligonucleotide impurities using a benchtop MALDI-TOF MS system