實(shí)用貼士 | 液相色譜柱的使用
發(fā)布時(shí)間:2020-04-23 閱讀次數(shù)：2421次
色譜柱
高效液相色譜儀
色譜柱是高效液相色譜儀的重要組成部分，在色譜儀分析系統(tǒng)中起著分離作用，是色譜分析的核心部件，對(duì)高效液相色譜柱的正確使用不僅能延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命，還能有效保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
以下簡(jiǎn)單介紹液相色譜柱
在使用過程中應(yīng)當(dāng)注意的問題
01
性能測(cè)試
新色譜柱使用前，最好進(jìn)行柱的性能測(cè)試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考依據(jù) (柱性能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異有所不同，在測(cè)試中需保證方法一致性）。
02
流動(dòng)相的配制
液相色譜是通過樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn)：
流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中（或長(zhǎng)時(shí)間保留在柱中）。
流動(dòng)相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)。
流動(dòng)相的黏度要盡量小，以便在使用較長(zhǎng)的分析柱時(shí)既能得到好的分離效果，同時(shí)又降低柱壓，延長(zhǎng)柱子的使用壽命（可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度）。
流動(dòng)相的物化性質(zhì)與使用的檢測(cè)器相適應(yīng)。
流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行。
流動(dòng)相配制好后，一定要進(jìn)行脫氣，除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體。
03
新色譜柱使用前沖洗步驟
1、首先查看色譜柱的說明書，注意色譜柱封存的溶劑、推薦流速、pH值、最大耐受柱壓、及最高使用溫度等信息。
2、如分析使用的流動(dòng)相與色譜柱內(nèi)儲(chǔ)存的溶劑混溶，可以直接使用流動(dòng)相參照色譜柱說明書中推薦的流速、溫度等條件沖洗色譜柱20倍柱體積以上。如果分析條件使用的流動(dòng)相與色譜柱內(nèi)儲(chǔ)存的溶劑不混溶，請(qǐng)選擇與色譜柱內(nèi)儲(chǔ)存溶劑和流動(dòng)相都混溶的溶劑，作為置換溶劑，逐步置換到分析使用的流動(dòng)相。每次置換均應(yīng)沖洗色譜柱20倍柱體積以上。
04
日常使用注意事項(xiàng)
1、請(qǐng)使用HPLC級(jí)別以上的試劑作為流動(dòng)相。
2、流動(dòng)相要用0.45um孔徑以下的微孔濾膜濾過。
3、流動(dòng)相的pH值不能超出色譜柱的適用范圍。
4、注意流動(dòng)相的流動(dòng)方向要與色譜柱標(biāo)識(shí)的方向一致。
5、容易滋生微生物的流動(dòng)相不要存放過久，要及時(shí)換新，以免微生物滋生污染色譜柱。
6、色譜柱分析結(jié)束后要及時(shí)徹底沖洗。
7、長(zhǎng)時(shí)間不用的色譜柱要將流動(dòng)相置換為色譜柱保存的溶劑，并兩端用堵頭封死保存。
8、色譜柱要避免劇烈碰撞、跌落等。
05
流動(dòng)相流速的選擇
因柱效是柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù)，使用不用的流速可得到不同的柱效。對(duì)于一根特定的色譜柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。對(duì)內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1mL/min，對(duì)于內(nèi)徑4.0mm柱，流速0.8mL/min為最佳。當(dāng)選用最佳流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長(zhǎng)?？刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間（如使用反相柱時(shí)，可適當(dāng)增加有機(jī)試劑甲醇或乙腈的含量）。
液相色譜柱在色譜分析中起著至關(guān)重要的角色，是樣品分離的核心，正確使用色譜柱才能達(dá)到更好的理想的分離效果，提高色譜柱的使用壽命。
島津液相色譜儀LC-40
融合“AI”與”loT”尖端技術(shù)的液相色譜儀
診斷精靈＆修復(fù)精靈
智能判斷流動(dòng)相中氣泡的存在，主動(dòng)排氣，自動(dòng)重啟分析序列
流速控制精靈
智能流量控制，流速逐漸增加至柱溫設(shè)定值，保護(hù)色譜柱
流動(dòng)相精靈
儲(chǔ)液盤內(nèi)置傳感器，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)流動(dòng)相剩余量
溶劑配置精靈
自動(dòng)以任意比例混合流動(dòng)相，方便、準(zhǔn)確地制備出分析所需流動(dòng)相
倉(cāng)溫管控精靈
空氣循環(huán)制冷控溫模塊，防止熱空氣進(jìn)入樣品倉(cāng)形成冷凝水
譜峰解析精靈
最小肩縫提取，共流出峰切割，線性范圍拓展
